一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胸腺基质细胞(Rat Thymic Stromal Cells)
- 细胞别称:TSC;胸腺上皮细胞;胸腺基质上皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经SPF级环境筛选)
- 组织来源:胸腺组织(皮质与髓质交界区)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或星形,可形成三维网状结构
- 细胞代数:P3 - P8(维持胸腺微环境支持功能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640基础培养基(含10% FBS+1%胸腺上皮细胞专用添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞膜稳定剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~60 - 84小时(与细胞间接触抑制特性相关)
- 供应限制:仅限基础研究使用,不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于37℃培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(接触抑制明显时需及时传代)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至基质网络解离
- 注意事项:
- 消化后需通过40μm细胞筛过滤去除未解离细胞团
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少培养箱扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+2%海藻糖)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测CD45阴性率(流式细胞术≥98%)
- 功能验证:共培养实验支持T细胞前体增殖(P5代细胞需维持活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞团碎裂(需提供物流温度监控数据)
- 到货7天内经PCR证实真菌/支原体污染
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供明场显微照片)
- 细胞角蛋白19免疫荧光鉴定未通过
- 不予重发情形:
- 未使用胶原包被培养器皿导致细胞悬浮死亡
- 擅自添加细胞因子改变培养体系
- 未按规范进行梯度降温直接冻存
- 超过说明书推荐代次(P8)后出现功能衰退
(注:所有实验操作需遵守生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因培养条件产生代际差异,建议定期进行功能验证)