一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠胸腺上皮细胞(Rat Thymic Epithelial Cells)
2. 细胞别称:RTEC;胸腺上皮细胞;胸腺基质细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康幼年或成年大鼠(性别不限,供体无免疫缺陷史)
5. 组织来源:胸腺组织(皮质与髓质交界区)
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:不规则多边形,形成连续单层时呈扁平铺路石样排列
8. 细胞代数:P3 - P10(优化传代策略确保细胞表型稳定性)
9. 细胞规格:5×10^4 cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含专用冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12(含5% FBS + 表皮生长因子 + 氢化可的松)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:饱和湿度
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
13. 倍增时间:约36 - 60小时(与细胞亚群及培养基批次相关)
14. 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱1小时再观察贴壁情况
2. 传代标准:细胞融合度达80%-90%(建议每2 - 3天传代)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,终止后离心去除酶液
5. 注意事项:
- 消化过程需轻摇培养皿加速细胞分离
- 首次传代后48小时内避免换液以维持细胞间连接
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清专用冻存液(含10% DMSO + 海藻糖)
2. 细胞密度:冻存浓度:8×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮储存
4. 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:CK5/CK8免疫荧光染色确认上皮特性
四、售后服务承诺
1. 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 到货7日内证实微生物污染(需提供检测原始数据)
- 细胞存活率低于85%(流式细胞术验证)
- 种属鉴定与标注不符
2. 不予重发情形:
- 收货后超72小时未进行复苏操作
- 自行更改培养基成分导致功能异常
- 未使用推荐包被材料影响细胞贴壁
- 未按规范进行细胞身份鉴定即发表数据
(所有操作需符合实验室生物安全二级标准,建议定期进行角蛋白标记物检测以监控细胞分化状态)