一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠垂体细胞(Rat Pituitary Cells)
2. 细胞别称:RPC;垂体腺细胞;垂体前叶细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经病理学筛选无内分泌疾病史)
5. 组织来源:垂体腺组织(完整垂体分离)
6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:不规则多边形或梭形,单层贴壁后呈簇状分布
8. 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证激素分泌功能稳定性)
9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS + 1%垂体细胞生长因子添加剂)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及稳定剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~72 - 96小时(受激素刺激条件影响显著)
14. 供应限制:仅用于科研实验,不可用于临床、药物生产或转基因研究
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置于培养箱1小时恢复贴壁
2. 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐密度3×10³ cells/cm²,避免低密度影响增殖)
4. 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助消化)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔拍打促使细胞脱落
5. 注意事项:
- 消化后需完全中和酶活性(避免残留酶损伤细胞膜)
- 首次传代后48小时内避免频繁观察,减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 5%海藻糖)
2. 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL(高密度提升复苏效率)
3. 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
4. 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:泌乳素(PRL)或生长激素(GH)分泌检测(P5代细胞需维持基础分泌活性)
四、售后服务承诺
1. 重发标准:
- 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控数据)
- 到货72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
- 复苏后细胞存活率低于85%(按标准流程复测确认)
- 物种鉴定(PCR法)与标识不符
2. 不予重发情形:
- 未按规范进行预冷培养基配制或培养器皿预处理
- 自行更改培养基成分导致细胞功能异常
- 超低温保存设备故障引发反复冻融
- 未执行推荐传代周期导致细胞老化
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因个体差异存在合理波动。)