大鼠垂体细胞

大鼠原代细胞

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XM-X02315×10^5大鼠原代细胞4500


一、细胞基本属性

1. 细胞名称:大鼠垂体细胞(Rat Pituitary Cells)

2. 细胞别称:RPC;垂体腺细胞;垂体前叶细胞

3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经病理学筛选无内分泌疾病史)

5. 组织来源:垂体腺组织(完整垂体分离)

6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

7. 细胞形态:不规则多边形或梭形,单层贴壁后呈簇状分布

8. 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证激素分泌功能稳定性)

9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

10. 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS + 1%垂体细胞生长因子添加剂)

11. 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及稳定剂),-150℃以下长期保存

13. 倍增时间:~72 - 96小时(受激素刺激条件影响显著)

14. 供应限制:仅用于科研实验,不可用于临床、药物生产或转基因研究


二、细胞培养操作指南

1. 收货处理:

   - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

   - 培养瓶:酒精消毒表面,静置于培养箱1小时恢复贴壁

2. 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)

3. 传代比例:1:2至1:3(推荐密度3×10³ cells/cm²,避免低密度影响增殖)

4. 消化方法:

   - 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助消化)

   - 37℃消化3 - 5分钟,轻柔拍打促使细胞脱落

5. 注意事项:

   - 消化后需完全中和酶活性(避免残留酶损伤细胞膜)

   - 首次传代后48小时内避免频繁观察,减少环境扰动


三、细胞冻存操作规范

1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 5%海藻糖)

2. 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL(高密度提升复苏效率)

3. 冻存步骤:

   - 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀

   - 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存

4. 复苏验证:

   - 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)

   - 功能验证:泌乳素(PRL)或生长激素(GH)分泌检测(P5代细胞需维持基础分泌活性)


四、售后服务承诺

1. 重发标准:

   - 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控数据)

   - 到货72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)

   - 复苏后细胞存活率低于85%(按标准流程复测确认)

   - 物种鉴定(PCR法)与标识不符

2. 不予重发情形:

   - 未按规范进行预冷培养基配制或培养器皿预处理

   - 自行更改培养基成分导致细胞功能异常

   - 超低温保存设备故障引发反复冻融

   - 未执行推荐传代周期导致细胞老化


(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因个体差异存在合理波动。)