一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胰岛细胞(Rat Islet Cells)
- 细胞别称:胰岛β细胞;胰腺内分泌细胞;胰岛细胞团
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:胰腺胰岛组织(经胶原酶消化分离纯化)
- 生长特性:贴壁或悬浮成团(依赖培养体系)
- 细胞形态:圆形或卵圆形细胞簇,边缘光滑,折光性良好
- 细胞代数:原代细胞(P0 - P2,保证功能性β细胞比例)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 11mM葡萄糖+生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:不适用(原代细胞以功能维持为主)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮培养:接种于低吸附培养皿,保持细胞团完整性
- 传代标准:细胞簇直径>150μm或培养液pH显著下降时需换液
- 传代方法
- 轻柔离心收集细胞团,机械吹打分散(避免酶消化损伤β细胞)
- 按1:2比例接种于新鲜培养基
- 注意事项
- 维持葡萄糖浓度(11 - 20mM)以支持胰岛素分泌功能
- 培养24小时后检测细胞活力,去除碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO + 海藻糖)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁴ - 1×10⁵ cells/簇
- 冻存步骤:梯度降温程序:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时内进行葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)实验
- 台盼蓝染色存活率≥85%,胰岛素阳性细胞比例≥70%
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 7天内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 胰岛素分泌功能缺失(需提供GSIS实验数据)
- 不予重发情形
- 未使用指定培养基导致细胞团解体
- 机械吹打过度造成单细胞率>30%
- 培养环境CO₂浓度异常影响细胞代谢
- 未定期检测培养基葡萄糖浓度导致功能衰退