一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胰腺星状细胞(Rat Pancreatic Stellate Cells)
- 细胞别称:PSC;胰腺星状细胞;胰腺间质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无胰腺疾病史)
- 组织来源:胰腺组织间质
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
- 细胞形态:静息态呈扁平星状,活化后转为纺锤形或多边形
- 细胞代数:P3 - P6(维持功能稳定及低自发活化率)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%抗生素+特定生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(活化后可能缩短至48小时)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时恢复贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(避免过度融合诱导自发活化)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离
- 注意事项:
- 避免机械损伤(减少细胞外基质释放)
- 活化后培养基需添加TGF - β抑制剂以维持静息态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及葡萄糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 预冷冻存液与细胞悬液混合后分装冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光检测(P3代细胞静息态标志物表达≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞存活率低于85%(需提供染色结果)
- 细胞标志物检测与描述不符
- 不予重发情形:
- 收货后超48小时未进行复苏操作
- 未使用推荐培养基或诱导剂导致细胞异常活化
- 反复冻融或不当处理造成细胞损伤
- 未按规范进行静息态维持培养
(注:所有操作需符合生物安全规范,建议使用原代细胞专用培养耗材。)