一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠甲状腺成纤维细胞(Rat Thyroid Fibroblasts)
2. 细胞别称:甲状腺间质细胞;甲状腺基质细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无甲状腺疾病史)
5. 组织来源:甲状腺组织间质分离
6. 生长特性:贴壁生长(依赖贴壁基质,形成致密单层)
7. 细胞形态:长梭形或星形,贴壁伸展后呈典型成纤维样形态
8. 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性和增殖活性)
9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+双抗+生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:约24 - 48小时(与培养密度及血清浓度相关)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心后重悬
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱平衡1小时
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙镁离子平衡液)
- 37℃消化1 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应保持基质合成活性)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3日内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
- 种属鉴定与描述不符(需提供STR检测报告)
2. 不予重发情形
- 客户未按规范储存或延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或血清导致细胞状态异常
- 自行反复冻融或不当操作造成细胞损伤
- 未执行污染检测直接进行实验引发的争议