一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠膀胱间质细胞（Rat Bladder Interstitial Cells）
- 细胞别称：RBIC；膀胱基质细胞；膀胱间充质细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无泌尿系统疾病史）
- 组织来源：膀胱组织间质层
- 生长特性：贴壁生长（需包被胶原或纤连蛋白基质）
- 细胞形态：长梭形或星形，贴壁后呈不规则网状排列
- 细胞代数：P3 - P8代（确保功能活性与表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：间质细胞专用培养基（含5% FBS+成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及稳定剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度与基质影响）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热的培养基轻柔混匀后离心重悬。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时，待温度与pH平衡后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶-EDTA溶液（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：
- 消化时轻摇培养瓶避免局部过度作用。
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶以保证贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）。
- 细胞密度：推荐冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液后分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥90%）。
- 功能验证：通过α - SMA免疫荧光染色确认间质细胞表型（P5代应维持标记阳性率≥85%）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常（需提供物流凭证）。
- 收货7日内经检测证实支原体污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏后活力低于85%（需提供台盼蓝染色图像）。
- 种属鉴定结果与描述不符（需提供STR分析数据）。
- 不予重发情形：
- 未按规范进行细胞复苏（如解冻后静置超4小时）。
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常或死亡。
- 未定期检测支原体引发交叉污染。
- 因反复冻融或不当操作导致的细胞损伤。
