一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠肾近端小管上皮细胞（Rat Renal Proximal Tubular Epithelial Cells）
- 细胞别称：RPTEC；肾小管上皮细胞；近端小管上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肾脏疾病史）
- 组织来源：肾皮质近端小管段
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白基质包被）
- 细胞形态：单层铺展呈多角形，融合后呈典型“铺路石”样排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与基因稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：肾上皮细胞专用培养基（含2% FBS+表皮生长因子及胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（受细胞密度及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（建议每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞极性及转运功能）
- 传代后12 - 16小时更换培养基以清除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）
- 功能验证：钠离子转运活性检测（P5代细胞需维持基础转运功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰包装状态证明）
- 2. 3日内经检测证实支原体/细菌污染（需提供荧光定量PCR报告）
- 3. 复苏后细胞活力低于85%（台盼蓝染色法复检）
- 4. 种属鉴定结果与声明不符（STR图谱比对）
- 不予重发情形：
- 1. 客户延迟复苏超过48小时
- 2. 使用非指定培养基或未进行基质包被
- 3. 未按规范进行梯度离心导致细胞丢失
- 4. 未执行推荐传代步骤引发功能异常
（以上内容基于标准操作流程制定，具体实验条件需根据研究目的优化）
