一、细胞基本属性
细胞名称为大鼠肾周肌成纤维细胞(Rat Perirenal Myofibroblasts),细胞别称有RPMFs、肾周成纤维细胞、肾被膜成纤维细胞。种属来源为大鼠(Rattus norvegicus),年龄性别为健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)。组织来源为肾周脂肪组织或肾被膜,生长特性是贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿),细胞形态为典型长梭形或星形,接触抑制后呈平行排列或漩涡状。细胞代数为P3 - P10(推荐使用代数,确保细胞活性及功能稳定性),细胞规格为1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)。培养基是DMEM/F12培养基(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%抗生素+成纤维细胞生长因子),培养条件为气相5% CO₂、温度37℃、湿度95%,冻存条件为含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS), - 150℃以下长期保存,倍增时间约36 - 48小时(依赖细胞密度及培养基质),供应限制为仅限科研用途,不可用于临床或药物开发。
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶75%酒精表面消毒,静置培养箱平衡1小时。传代标准为细胞融合度达90% - 95%(推荐每2 - 3天传代一次),传代比例为1:2至1:4(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²),消化方法为使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。注意事项为消化后轻柔吹打避免机械损伤、首次换液需在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方为含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS),细胞密度为冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL,冻存步骤为离心后去上清,缓慢滴加冻存液重悬,程序降温4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 24h → 液氮长期存储,复苏验证为复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)、功能验证α - SMA免疫荧光检测(P5代细胞应维持肌成纤维细胞标志物表达)。
四、售后服务承诺
重发标准:1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监测记录);2. 5日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告);3. 细胞贴壁率低于80%(接种24小时显微镜评估);4. 种属鉴定与描述不符。不予重发情形:1. 未按规范进行预包被处理导致贴壁失败;2. 使用非推荐血清浓度或生长因子添加剂;3. 未定期进行细胞形态学监控;4. 未执行推荐的胶原基质包被流程。