一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠输尿管成纤维细胞(Rat Ureteral Fibroblasts)
细胞别称:RUFs;输尿管间质细胞;输尿管基质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
组织来源:输尿管中段组织(经胶原酶消化法分离)
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型长梭形或星形,汇合后呈平行束状排列
细胞代数:P3 - P8(确保细胞外基质分泌功能稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+成纤维生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:24 - 48小时(与培养密度及血清浓度相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于CO₂培养箱
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
消化前需用DPBS充分清洗去除血清成分
首次换液应在传代后6 - 8小时进行
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
细胞悬液与冻存液按1:1比例混合
程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞转化潜能
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录证明)
2. 到货72小时内经PCR检测证实微生物污染
3. 复苏后活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
4. 种属鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 未按推荐使用纤维连接蛋白包被培养器皿
2. 擅自添加TGF - β等细胞因子导致表型改变
3. 超过14天未进行首次传代导致细胞老化
4. 未定期进行STR检测造成细胞交叉污染