一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肾间质成纤维细胞(Rat Renal Interstitial Fibroblasts)
细胞别称:RIRF;肾间质纤维母细胞;肾成纤维细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾间质组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
细胞形态:长梭形或星形,细胞质伸展明显
细胞代数:P3 - P8(保持细胞增殖活性与功能稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与细胞密度及传代次数相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
- 消化终止时需加入含血清培养基中和
- 首次换液应在传代后12 - 16小时进行
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后重悬于预冷冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持表型特征)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测证据)
3. 细胞复苏存活率低于85%(经第三方检测确认)
4. 物种鉴定结果与标注不符
不予重发情形:
1. 未按说明书进行贴壁前离心处理
2. 使用血清浓度不足的培养基培养
3. 未定期检测支原体导致污染扩散
4. 超过推荐代次(P8)后出现功能异常