一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠前列腺基底细胞(Rat Prostatic Basal Cells)
细胞别称:前列腺基底上皮细胞;前列腺干细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年雄性(SPF级,8 - 10周龄)
组织来源:前列腺基底细胞层
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,边缘清晰,胞质透亮
细胞代数:P2 - P6(维持基底细胞特性关键代数段)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(专用冻存液)
培养基:PrEBM基底细胞专用培养基(含5% FBS+双氢睾酮添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约60 - 84小时(需定期添加表皮生长因子)
供应限制:仅供基础研究使用,不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管:37℃水浴快速解冻后离心去除冻存液,重悬于预热培养基
·培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞密度达70% - 80%融合时传代(高密度易诱发鳞状分化)
传代比例:1:1至1:2(推荐使用胶原酶Ⅳ消化系统)
消化方法:
·0.25%胶原酶Ⅳ+0.01% EDTA混合消化液
·37℃消化8 - 12分钟,轻柔吹打解离细胞团块
注意事项:
·禁止使用胰蛋白酶(破坏基底细胞表面标志物)
·传代后需添加10ng/mL EGF维持干细胞特性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物源冻存液(含7.5% DMSO+2%甲基纤维素)
细胞密度:冻存浓度:2×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
·预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后立即启动程序降温
·程序降温仪设置:-1℃/min降至-80℃,转存液氮罐
复苏验证:
·复苏后48小时进行CK5/CK14免疫荧光鉴定(阳性率应≥90%)
·功能验证:三维培养体系形成腺体样结构能力检测
四、售后服务承诺
重发标准:
1.物流温度记录仪显示超温事件(>-130℃持续30分钟)
2.收到细胞7日内证实支原体污染(需第三方检测报告)
3.CK5表达阳性率低于80%(需提供荧光染色原始图像)
不予重发情形:
1.未使用原代配套培养基进行培养
2.消化时采用机械刮除法代替酶消化
3.超过推荐代数(P6)仍继续传代使用
4.未按操作手册进行胶原包被直接接种
注:所有技术参数均基于SD大鼠品系验证,其他品系可能存在生物学特性差异,建议先行小样测试。