一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠前列腺成纤维细胞(Rat Prostate Fibroblasts)
- 细胞别称:RPF;前列腺基质细胞;前列腺成纤维样细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年雄性大鼠(供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:前列腺基质组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或星形,贴壁伸展后呈典型成纤维样
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数以确保功能稳定性)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS + 1%双抗 + 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖细胞密度及传代条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁紧密时操作)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞外基质分泌能力)
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应保持基质合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 不予重发情形:
- 收货后超过72小时未按规范复苏
- 使用非推荐培养基导致细胞形态异常
- 自行修改冻存液配方引发细胞损伤
- 未定期检测支原体导致交叉污染
- (注:以上操作需严格遵循生物安全规范,建议定期进行STR鉴定及功能验证。)