一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠前列腺上皮细胞(Rat Prostatic Epithelial Cells)
细胞别称:RPEpiC;前列腺上皮细胞;前列腺细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年雄性(供体筛选无泌尿系统疾病史)
组织来源:前列腺组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型铺路石样单层,紧密连接形成连续上皮结构
细胞代数:P3 - P8(维持上皮细胞极性及分泌特性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:前列腺上皮专用培养基(含5% FBS+上皮细胞生长因子及雄激素添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及糖原保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(依赖雄激素浓度与细胞密度)
供应限制:仅用于基础研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加入预热培养基重悬
- 培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时
传代标准:融合度达80% - 90%(每3 - 4天传代,维持高增殖活性)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,细胞间隙扩大后轻柔拍打终止
注意事项:
- 消化全程需显微镜监控,防止细胞脱落成团
- 传代后12小时内补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖复合保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL(高密度保障复苏效率)
冻存步骤:
- 消化离心后缓慢逐滴加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 20min → -80℃过夜→液氮永久存储
复苏验证:
- 复苏后贴壁率≥85%(12小时观察细胞伸展状态)
- 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色(P5代应保持>90%阳性率)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞团化(需提供冷链数据)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供电镜扫描图)
3. 细胞活性低于85%(双荧光活死染色法)
4. 物种鉴定与标识不符
不予重发情形:
1. 未使用专用培养基导致去分化
2. 实验操作污染引发交叉感染
3. 机械损伤导致细胞膜完整性破坏
4. 未按要求进行定期传代保养