一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠膀胱平滑肌细胞(Rat Bladder Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:RBSMC;膀胱平滑肌细胞;膀胱SMC
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:膀胱组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被的培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,平行排列生长
- 细胞代数:P3 - P8(保证收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+生长因子添加剂,如hEGF、胰岛素等)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱内平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含低浓度Ca²⁺/Mg²⁺)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
- 注意事项:
- 消化终止后轻柔吹打避免机械损伤。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色及钙离子刺激收缩实验。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控数据)。
- 3日内证实支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告)。
- 细胞贴壁率低于80%(接种24小时后显微观察统计)。
- 种属鉴定结果与大鼠不符(STR分析)。
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行胶原蛋白包被导致细胞脱落。
- 使用非推荐培养基或血清浓度过高引起表型改变。
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮。
- 实验操作污染导致细胞状态异常。
(注:本产品简介基于标准操作流程编写,具体实验条件需根据研究目的优化调整。)