一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肾足细胞(Rat Renal Podocytes)
- 细胞别称:肾小球足细胞;肾上皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别根据实验需求可选,供体无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾小球毛细血管袢
- 生长特性:条件性贴壁生长(需特定细胞外基质包被培养器皿)
- 细胞形态:星状或多突状,细胞间通过足突形成滤过屏障
- 细胞代数:P3 - P10(维持足细胞分化标志物表达)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:足细胞专用培养基(含5%胎牛血清+足细胞分化因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖分化状态及培养条件)
- 供应限制:仅用于体外研究,不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴轻柔解冻,加入预热的足细胞专用培养基离心后重悬;培养瓶:表面消毒后置于CO₂培养箱平衡1小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(避免过度融合导致分化异常)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液轻柔消化,37℃作用2 - 3分钟,显微镜下观察足突回缩后终止
- 注意事项:分化阶段需添加足细胞特异性诱导剂,传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心后重悬于冻存液,程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法),分化标志物检测(Nephrin/WT1免疫荧光阳性率≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2. 72小时内证实支原体污染(需提供检测报告);3. 细胞标志物表达缺失(需提供免疫荧光原始数据)
- 不予重发情形:1. 未使用指定基质包被培养器皿导致细胞脱落;2. 自行诱导分化后出现功能异常;3. 未按规范进行周期性分化状态检测