一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肾小球内皮细胞(Rat Glomerular Endothelial Cells)
细胞别称:RGEC;肾小球内皮细胞;肾微血管内皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾小球微血管段
生长特性:贴壁生长(需包被细胞外基质)
细胞形态:单层铺展呈多角形,接触抑制后呈现典型镶嵌式排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与形态均一性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:内皮细胞专用培养基(含2%胎牛血清+内皮生长因子复合物)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(与培养密度及基质包被相关)
供应限制:仅限科研使用,不可用于临床治疗或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心后重悬
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置于培养箱平衡2小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.05%胰酶 - EDTA溶液(不含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 2分钟,显微镜下确认细胞边缘收缩后终止消化
注意事项:
- 严格控制消化时间(避免紧密连接蛋白降解)
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→转移至液氮
复苏验证:
- 复苏后24小时进行细胞活力检测(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:Ⅷ因子免疫荧光染色确认内皮特性
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞STR鉴定与物种信息不符
4. 复苏存活率低于85%(按规范操作复测)
不予重发情形:
1. 收货后超72小时未进行复苏操作
2. 使用非指定培养基或未进行基质包被
3. 反复冻融或离心转速超过1200rpm
4. 未执行建议的传代密度导致细胞老化