一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠肾小球系膜细胞(Rat Glomerular Mesangial Cells)
2. 细胞别称:Mesangial Cells;肾小球系膜细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
5. 组织来源:肾脏肾小球组织
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
7. 细胞形态:典型长梭形或星形,融合后呈网状排列
8. 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和低传代变异)
9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:Mesangial Cell Medium(含5% FBS +系膜细胞特异性生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
13. 倍增时间:约48 - 72小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免剧烈吹打(保护细胞外基质受体)
- 首次换液需在传代后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程中温度记录异常(需提供物流温度监控数据)
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 细胞特异性标志物鉴定不符
2. 不予重发情形
- 超时复苏(超过收货后72小时)
- 使用非指定培养基或未预包被培养器皿
- 未按要求进行细胞基质包被导致贴壁失败
- 自行改造细胞或进行基因编辑操作