一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肾小管上皮细胞(Rat Renal Tubular Epithelial Cells)
- 细胞别称:RTEpiC;肾小管上皮细胞;肾皮质上皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾小管段(近曲小管为主)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白等细胞外基质涂层)
- 细胞形态:典型“鹅卵石样”单层,接触抑制后呈紧密排列的多边形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与代谢活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:肾上皮细胞专用培养基(含2% FBS+上皮细胞生长因子及转铁蛋白)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质涂层状态)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达85%-90%(常规每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.05%胰蛋白酶 - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项
- 避免过度消化(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后24小时更换新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:钠钾ATP酶活性检测(P5代细胞应维持正常离子转运功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供干冰包装状态证明)
- 3天内证实支原体或细菌污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏活力低于90%(台盼蓝染色法)
- 物种鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过72小时
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常
- 未按梯度降温导致冻存损伤
- 未定期检测支原体直接用于实验