一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肠粘膜上皮细胞(Rat Intestinal Mucosal Epithelial Cells)
细胞别称:RIMEC;肠上皮细胞;小肠黏膜上皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
组织来源:肠黏膜组织(取自空肠或回肠段)
生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
细胞形态:单层柱状或立方状,接触抑制后呈紧密排列
细胞代数:P3 - P8(原代细胞经传代优化,保留分化特性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:肠上皮细胞专用培养基(含EGF、N2/B27添加剂及低浓度胎牛血清)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制:仅限体外科研使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热的完全培养基离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置于培养箱平衡2小时,待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达80%-90%(建议每3天观察一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含1mM Ca²⁺以保护细胞连接)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下见细胞间隙增大后立即终止反应
注意事项:
- 消化后轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 台盼蓝染色检测复苏存活率(标准≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应保持典型肠上皮特征)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录凭证)
2. 收到后48小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图片)
4. 细胞标志物检测与描述不符
不予重发情形:
1. 未按推荐培养基和包被条件培养
2. 消化时间过长导致细胞碎片率>20%
3. 收到后超72小时未进行复苏操作
4. 自行修改培养参数导致功能异常
(注:本产品经CK18、ZO - 1免疫荧光鉴定,符合肠上皮细胞特性,适用于屏障功能、营养吸收及炎症机制研究。)