一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肛门内括约肌平滑肌细胞(Rat Anal Sphincter Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:RASMC;肛门括约肌平滑肌细胞;IAS - SMC
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无消化系统疾病史)
- 组织来源:肛门内括约肌组织(平滑肌层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤状,平行排列呈束状结构
- 细胞代数:P3 - P8(经功能验证确保收缩特性及标志物表达)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS+平滑肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无动物源冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(受细胞密度及基质影响)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后,加入3mL预温培养基离心洗涤
- 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱4小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁呈致密单层时操作)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 消化终止需加入含血清培养基(比例≥1:1)
- 避免频繁观察扰动细胞(影响收缩功能表达)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含7% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(要求≥90%)
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩反应(P5代细胞需维持钙震荡能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输链断裂导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
- 细胞标志物α - SMA免疫荧光检测阴性
- 种属鉴定与大鼠基因组不符
- 不予重发情形:
- 解冻后未按规范进行胶原包被培养
- 自行修改培养基配方导致功能异常
- 机械拉伸实验超出细胞耐受强度
- 未定期检测肌动蛋白表达即进行功能研究