一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肝卵圆细胞(Rat Hepatic Oval Cells)
- 细胞别称:肝干细胞;肝脏祖细胞;肝前体细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经肝功能筛查合格)
- 组织来源:肝脏组织门静脉周围区域
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则梭形或卵圆形,单层培养时可呈现集落样增殖
- 细胞代数:P3 - P10(维持干细胞特性与分化潜能)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
- 培养基:肝祖细胞专用培养基(含2% FBS+肝细胞生长因子+表皮生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞膜稳定剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(与培养密度及生长因子浓度相关)
- 供应限制:仅用于基础研究,不可应用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离基质
- 注意事项:传代后需添加10ng/mL HGF维持干性;避免频繁观察干扰细胞贴壁(建议24小时后再换液)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含12% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液;程序降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证:复苏后48小时通过CK19免疫荧光鉴定干性标记;分化能力检测:诱导培养14天后检测Albumin表达
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);2. 到货7日内经PCR证实支原体污染;3. 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法);4. 细胞特异性标志物鉴定不达标
- 不予重发情形:1. 未使用配套基质包被培养器皿;2. 擅自更改培养基配方导致功能异常;3. 超过推荐代数(P10)仍要求质保;4. 未提供污染或活性检测原始数据