一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠胃黏膜成纤维细胞(Rat Gastric Mucosa Fibroblasts)
细胞别称:胃成纤维细胞;胃黏膜纤维母细胞;RGF
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成体大鼠(性别不限,供体筛选无胃部疾病史)
组织来源:胃黏膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
细胞形态:典型长梭形或不规则三角形,融合后呈网状排列
细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS+成纤维细胞生长添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及基质包被相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管:37℃水浴快速解冻,300g离心5分钟,弃上清后重悬于预热培养基
·培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
·使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
·37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打至细胞脱壁后立即终止
注意事项:
·消化后需300g离心去除酶残留
·传代后12小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
·细胞悬液与冻存液按1:1混合
·程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
·复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
·功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应保持Ⅳ型胶原分泌能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输失效导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%
4. 种属鉴定与标识不符
不予重发情形:
1. 解冻后未按规范进行贴壁培养(如直接离心去除冻存液)
2. 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败
3. 超过推荐代数(P8)后出现功能衰退
4. 未进行常规支原体检测引发实验污染