一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肠间质细胞(Rat Intestinal Interstitial Cells)
细胞别称:RIIC;肠间质成纤维细胞;肠道间充质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无肠道疾病史)
组织来源:肠道间质组织(分离自小肠或结肠黏膜下层)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或多极星状,融合后呈网状交错排列
细胞代数:P3 - P6(优化代数确保功能活性与增殖能力)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:间质细胞专用培养基(含5% FBS+碱性成纤维细胞生长因子+胰岛素转铁蛋白硒添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及胎牛血清替代物),液氮气相长期保存
倍增时间:约60 - 84小时(与细胞密度及生长因子浓度相关)
供应限制:仅限于体外研究,不可用于人体或兽用治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入3mL预热培养基低速离心去冻存液;培养瓶:酒精擦拭外壁后置于培养箱平衡4小时再换液
传代标准:细胞密度达70%-80%融合(避免过度融合引起分化)
传代比例:1:2至1:4(建议初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶至细胞间隙扩大后终止
注意事项:终止消化后需轻柔吹打防止细胞断裂;传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物源冻存液(含8% DMSO+海藻糖+胎牛血清替代物)
细胞密度:推荐冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:预冷冻存管至4℃后分装细胞悬液;程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 4小时 → -80℃ 12小时 → 液氮贮存
复苏验证:复苏后48小时进行Calcein - AM/PI双染活率检测(标准≥85%);功能验证:α - SMA免疫荧光鉴定(P3代细胞应维持标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 干冰运输中温度记录异常导致细胞团块破裂(需提供物流温度记录);2. 到货7日内经qPCR证实真菌/支原体污染;3. 复苏后活率低于80%(需提交染色检测视频);4. 物种STR分型与标注不符
不予重发情形:1. 未使用配套基质胶导致细胞贴壁失败;2. 擅自更改培养基配方引发细胞分化;3. 液氮贮存中断超过24小时造成冻存管泄漏;4. 未按操作手册进行胶原酶辅助消化