一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠肝间质细胞（Rat Liver Mesenchymal Cells）
- 细胞别称：RLMC；肝星状细胞；肝间质成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织间质区域
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则纺锤形或星形，可形成网状结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和低传代变异）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+肝细胞生长因子+胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 60小时（与培养密度及生长因子浓度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后，静置培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用试剂：0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 操作：37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化时间过长（防止细胞外基质过度降解）
- 传代后12小时内避免移动培养瓶，确保贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应维持间质表型）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货3天内证实支原体或细菌污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（台盼蓝染色法）
- 细胞STR鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常
- 反复冻融或机械损伤影响细胞状态
- 未按规范进行无菌操作引发交叉污染
