一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠结肠神经元细胞
- 细胞别称:结肠肠神经系统神经元;肠肌间神经丛神经元
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:结肠组织肌间神经丛
- 生长特性:贴壁生长(需基质胶或层粘连蛋白包被)
- 细胞形态:典型神经元多极形态,可见轴突与树突分支
- 细胞代数:原代细胞(P0 - P2,建议使用前3代以维持功能特性)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用神经细胞冻存液)
- 培养基:神经细胞专用培养基(含2% B27添加剂 + 神经营养因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:神经细胞专用冻存液(含10% DMSO及抗氧化剂),-150℃以下长期保存
- 功能特性:表达β - III微管蛋白、NeuN等神经元标志物,具备电生理活性
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热的神经培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞密度达70% - 80%(原代神经元建议有限传代)
- 传代比例:建议1:1至1:2分种(接种密度3×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含神经保护剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞突起回缩后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打损伤细胞突触结构
- 传代后48小时内禁止换液,维持神经营养因子浓度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:神经细胞专用冻存液(含10% DMSO、海藻糖及神经营养因子)
- 细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 轻柔离心后重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测神经元特异性标志物(β - III微管蛋白免疫荧光≥90%)
- 功能性验证:钙离子成像检测电脉冲响应能力
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
- 7天内证实支原体污染(提供第三方检测报告)
- 神经元标志物表达率低于80%(免疫荧光定量结果)
- 不予重发情形:
- 未使用推荐包被基质导致细胞贴壁失败
- 传代次数超过P3导致功能退化
- 未定期添加神经营养因子引发细胞凋亡
- 未按规范进行电生理活性检测
(注:本产品需配合专用神经培养耗材使用,常规培养瓶可能导致细胞活性下降)