一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠肝窦内皮细胞（Rat Liver Sinusoidal Endothelial Cells）
- 细胞别称：LSEC；肝窦内皮细胞；肝血窦内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏肝窦组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质或特定细胞外基质包被）
- 细胞形态：扁平梭形或长条状，形成连续单层后呈现筛孔样结构
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数，确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：大鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS+肝窦内皮细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与培养密度及基质包被相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含1mM EDTA），37℃消化2 - 3分钟，终止后轻柔吹打至单细胞悬液
- 注意事项：避免机械损伤（筛孔结构易受剪切力破坏）；传代后12小时内避免频繁观察以维持细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
- 复苏验证：复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）；功能验证：CD31免疫荧光染色及Fenestrae结构电镜观察
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；2. 到货3天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）；3. 细胞活力低于85%（基于台盼蓝染色结果）；4. 物种鉴定与承诺不符（STR比对验证）
- 不予重发情形：1. 解冻后超72小时未进行细胞接种；2. 自行更换培养基导致功能异常；3. 未按规范进行细胞基质包处理；4. 液氮保存设备故障导致的反复冻融
