一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肝星状细胞(Rat Hepatic Stellate Cells)
- 细胞别称:HSC;肝星状细胞;肝脏间质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肝脏疾病史)
- 组织来源:肝脏组织非实质细胞组分
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:静息态呈扁平星状,活化后转为纺锤形或类成纤维细胞样
- 细胞代数:P3 - P8(维持表型稳定性和功能特性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
- 培养基:Stellate Cell Medium(含10% FBS+肝细胞生长因子及维生素A补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(与活化状态及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁后静置培养箱4小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(静息态细胞每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含1%胶原酶预消化10分钟)。
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 避免频繁传代导致自发活化(建议使用低浓度血清培养基)。
- 传代后48小时内避免更换培养基以维持细胞黏附。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 40min → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光检测(P5代细胞静息态占比应>70%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 7天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)。
- 细胞存活率低于85%(台盼蓝染色法)。
- 物种鉴定与标识不符(STR比对结果异常)。
- 不予重发情形:
- 客户未按规范进行胶原包被导致细胞活化。
- 使用含高浓度血清培养基引发表型改变。
- 解冻后静置培养超过96小时未贴壁。
- 未进行细胞静息态验证直接用于实验。
- 本产品符合ISO细胞培养标准,提供STR鉴定报告及支原体检测证明。