一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠肝外胆管上皮细胞(Rat Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells)
- 细胞别称:RBDEC;胆管上皮细胞;胆管细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无肝胆系统疾病史)
- 组织来源:肝外胆管组织(经显微分离获取)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺展,融合后呈多角形或立方状,核质比适中
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:胆管上皮细胞专用培养基(含2% FBS+上皮生长因子+肝细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(受培养密度及基质影响)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱1小时恢复
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后轻柔吹散细胞团
- 注意事项:
- 避免机械损伤(维持细胞极性及紧密连接完整性)
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+10%海藻糖)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CK19免疫荧光染色确认上皮特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提交污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色结果)
- 细胞标志物鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 未在48小时内完成细胞复苏操作
- 自行更换培养基导致功能异常
- 未按推荐传代密度进行培养
- 未使用胶原包被培养器皿引发细胞脱落
(注:以上操作均需在二级生物安全柜内完成,实验废弃物按生物危害品处理)