一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肝内胆管上皮细胞(Rat Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells)
细胞别称:RBDEC;胆管上皮细胞;肝胆管上皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肝胆系统疾病史)
组织来源:肝内胆管组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展呈多边形,接触抑制后呈现典型铺路石样排列
细胞代数:P3 - P8(经严格质量控制确保功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS+胆管上皮细胞专用生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(与细胞密度及基质包被相关)
供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.05%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含1mM钙离子)
37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:
严格控制消化时间以保护细胞间紧密连接结构
传代后12小时内避免移动培养器皿确保贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透压调节剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃ 30分钟→-20℃ 2小时→-80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)
功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应保持特征性表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录凭证)
2. 7日内证实微生物污染(需提交第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(按规范操作复测确认)
4. 物种鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 客户未按规程进行胶原基质预包被导致贴壁失败
2. 使用非指定培养基引发细胞形态异常
3. 反复冻融或不当离心操作造成细胞损伤
4. 未执行推荐传代标准导致细胞过早衰老