一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠结肠成纤维细胞（Rat Colonic Fibroblasts）
- 细胞别称：结肠成纤维细胞；结肠间质细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无结肠疾病史）
- 组织来源：结肠组织间质层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被表面）
- 细胞形态：典型长梭形或不规则三角形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持功能稳定性与增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖血清浓度与细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后，静置培养箱1小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶辅助消化）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙扩大后立即终止。
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度（防止细胞骨架损伤）。
- 传代后12小时内避免频繁观察，确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活性（台盼蓝染色存活率≥90%）。
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应保持分泌功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供运输温度记录）。
- 收货后72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 细胞复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）。
- 细胞标志物检测与描述不符（需提供免疫荧光验证）。
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行细胞传代或冻存。
- 使用非指定培养基导致功能异常。
- 细胞存放超72小时未复苏或反复冻融。
- 实验操作污染导致细胞状态受损。
