一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠结肠粘膜上皮细胞(Rat Colonic Mucosal Epithelial Cells)
- 细胞别称:RCMEC;结肠上皮细胞;肠黏膜上皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,无肠道疾病史)
- 组织来源:结肠黏膜层(经机械分离与酶消化法提取)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,融合后呈多角形或立方状
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用上皮细胞培养基(含2% FBS、EGF及肠上皮生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与细胞密度及培养基批次相关)
- 供应限制:仅供科学研究,不可用于临床、药物开发或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置于培养箱内2小时以平衡温湿度。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度为4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含钙镁离子螯合剂)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应。
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止紧密连接蛋白降解)。
- 传代后6小时内更换新鲜培养基以提升贴壁率。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20% FBS及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→转移至液氮。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)。
- 功能验证:跨膜电阻值检测(P5代细胞应维持屏障完整性)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)。
- 72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)。
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)。
- 细胞STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
- 收货后未按规范储存或超时复苏(超过48小时)。
- 自行更换培养基或添加剂导致细胞状态异常。
- 操作不当引起反复冻融损伤。
- 未按要求进行污染筛查直接用于实验。
(注:本产品严格遵循伦理标准,所有细胞来源均通过合规途径获取,实验操作需符合所在机构生物安全规范。)