一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠小肠成纤维细胞（Rat Small Intestinal Fibroblasts）
- 细胞别称：RSIF；小肠固有层成纤维细胞；肠道间质细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：小肠组织固有层（经酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或不规则三角形，呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（经严格质控确保遗传稳定性与功能活性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与培养密度及血清浓度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时恢复贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化30秒 - 1分钟，轻拍瓶壁至细胞脱落后终止
- 注意事项：
- 避免消化液残留（建议用含血清培养基充分中和）
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃ 12h → 液氮长期存储
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5天内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 复苏后细胞活力低于85%（需提供台盼蓝染色图像）
- 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 客户延迟复苏超过48小时
- 擅自更改培养基成分导致细胞异常
- 未按梯度降温要求直接冻存
- 未进行常规支原体检测即用于共培养实验
