一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠小肠隐窝上皮细胞
- 细胞别称:小肠隐窝细胞;肠道隐窝上皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:小肠隐窝部位
- 生长特性:贴壁生长(依赖基质胶或胶原包被)
- 细胞形态:柱状或立方状单层排列,形成典型隐窝样结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保干细胞特性及分化潜能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS+肠道上皮细胞专用生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖隐窝干细胞活性及培养体系)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心后接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置于培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化后轻柔吹打以保护微绒毛结构
- 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后与冻存液混合,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应保持隐窝干细胞特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 收货3日内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 复苏存活率低于85%(经双方复检确认)
- 细胞标志物表达与说明书不符
- 不予重发情形:
- 超72小时未复苏或未按规范预处理
- 使用非指定培养基导致细胞分化异常
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按要求进行污染检测直接用于实验