一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠小肠黏膜上皮细胞（Rat Small Intestinal Mucosal Epithelial Cells）
- 细胞别称：SIEC；小肠上皮细胞；肠道黏膜上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：小肠黏膜层（隐窝 - 绒毛轴区域分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或基质胶包被）
- 细胞形态：单层铺展，呈柱状或多边形，紧密连接排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持肠上皮极性及屏障功能）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用肠上皮细胞培养基（含EGF、B27等生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基离心后重悬接种；培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱2小时平衡后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（建议初始密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含低浓度Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞间隙增大后立即终止。
- 注意事项：避免消化过度（影响紧密连接蛋白完整性）；传代后12小时内更换培养基以去除死细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）；功能验证：碱性磷酸酶活性检测或ZO - 1免疫荧光染色确认上皮屏障特性。
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；2. 收货3天内证实微生物污染（需提供检测报告）；3. 复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色图像）；4. 细胞种属鉴定结果不符。
- 不予重发情形：1. 细胞解冻后超72小时未处理；2. 使用非指定培养基或未包被培养器皿；3. 未按规范进行传代导致细胞分化或凋亡；4. 自行修改培养条件引发的功能异常。
