一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠胃成纤维细胞(Rat Gastric Fibroblasts)
细胞别称
RGF;胃部成纤维细胞;胃基质细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无胃部疾病史)
组织来源
胃组织黏膜下层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或星形,增殖期呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+双抗+生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(与细胞密度及传代操作相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂)
• 37℃消化30 - 60秒,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 避免消化过度(损伤细胞膜完整性)
• 首次换液需在传代后24小时完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后缓慢加入预冷冻存液
• 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
• 功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 7日内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 复苏存活率低于90%(经第三方检测确认)
4. 种属鉴定与描述不符
不予重发情形
1. 客户超时复苏(收货后>72小时)
2. 自行更换培养基导致功能异常
3. 非规范操作引起的细胞损伤
4. 未按要求进行定期支原体检测