一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胃平滑肌细胞(Rat Gastric Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:胃SMC;胃平滑肌细胞;胃肌层细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无胃肠疾病史)
- 组织来源:胃组织肌层(分离自胃体或胃窦部平滑肌层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤状,平行排列成束状结构
- 细胞代数:P3 - P5(确保收缩功能及表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+平滑肌细胞生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与基质包被条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
- 注意事项
- 避免机械刮取损伤细胞(建议酶消化法)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→转入液氮
- 复苏验证
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光鉴定(P4代细胞应维持平滑肌标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰融化证据)
- 5天内证实细菌/真菌污染(需提供微生物检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- 物种鉴定与宣传不符(STR或PCR检测结果不符)
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐消化方法导致细胞损伤
- 未按规范进行基质包被影响细胞贴壁
- 自行修改培养基配方导致功能异常