一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠食管成纤维细胞（Rat Esophageal Fibroblasts）
细胞别称：REF；食管成纤维细胞；食道纤维母细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体无消化系统疾病史）
组织来源：食管组织间质层
生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质附着）
细胞形态：长梭形或纺锤状，单层贴壁后呈交错网状
细胞代数：P3 - P10（确保功能稳定性和增殖活性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度及血清浓度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱内1小时平衡温湿度
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞间隙增大后立即终止
注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）
- 首次换液建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色确认成纤维细胞表型
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
2. 收货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
3. 复苏存活率低于80%（需提供台盼蓝染色结果）
4. 细胞种属鉴定与描述不符
不予重发情形：
1. 客户未按规范进行预温培养基或解冻操作
2. 使用非推荐血清浓度导致细胞分化异常
3. 自行更改培养条件引发的细胞功能改变
4. 未定期进行支原体检测造成交叉污染
