一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠食管平滑肌细胞(Rat Esophageal Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:RESMC;食管平滑肌细胞;食管SMC
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无消化道疾病史)
- 组织来源:食管平滑肌组织层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,平行排列成束状结构
- 细胞代数:P3 - P5(保证收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+平滑肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养基成分及细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:
- 消化过程避免剧烈吹打(保护细胞收缩结构)
- 传代后48小时内避免换液(维持细胞贴壁稳定性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥85%)
- 功能验证:钙离子刺激收缩实验(P3代细胞应保持基础收缩活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 7天内证实支原体污染(需提供荧光PCR检测结果)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
- 种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 未使用胶原包被培养器皿导致细胞贴壁失败
- 自行更改培养基配方引发细胞表型改变
- 超量传代(超过P5)导致功能丧失
- 未按规范进行功能验证直接用于实验
(注:本产品需配合胶原蛋白包被培养器皿使用,实验前需确认细胞收缩功能相关检测方案。)