大鼠肾动脉平滑肌细胞

大鼠原代细胞

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XM-X01735×10^5大鼠原代细胞4050


一、细胞基本属性

细胞名称

大鼠肾动脉平滑肌细胞(Rat Renal Artery Smooth Muscle Cells)

细胞别称

RASMC;肾动脉SMC;血管平滑肌细胞

种属来源

大鼠(Rattus norvegicus)

年龄性别

健康成年大鼠(性别不限,供体经病理学筛查无血管疾病)

组织来源

肾动脉中膜层(经酶消化法分离纯化)

生长特性

贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态

典型长梭形,平行排列生长,可观察到收缩性伪足

细胞代数

P3 - P8(确保表型稳定及功能性蛋白表达)

细胞规格

5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)

培养基

Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS +内皮素 - 1生长添加剂)

培养条件

气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件

无血清冻存液(含8% DMSO及细胞膜稳定剂),-150℃以下长期保存

倍增时间

约48 - 60小时(与细胞密度及传代处理相关)

供应限制

仅用于体外研究,禁止临床或体内移植用途


二、细胞培养操作指南

收货处理

• 冻存管:37℃水浴解冻后转移至含5mL培养基的离心管,800rpm离心3分钟

• 培养瓶:表面消毒后静置于培养箱1小时,待温度平衡后更换新鲜培养基

传代标准

细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察生长状态)

传代比例

1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)

消化方法

• 使用0.25%胰蛋白酶 - 0.02% EDTA溶液

• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止

注意事项

• 避免剧烈吹打(防止收缩蛋白结构损伤)

• 传代后12小时内避免移动培养器皿


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方

无血清冻存液(含8% DMSO + 20% FBS +渗透压调节剂)

细胞密度

冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

冻存步骤

• 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封

• 程序降温:4℃ 1h → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮长期储存

复苏验证

• 复苏后12小时检测细胞贴壁率(应≥85%)

• 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞阳性率需>95%)


四、售后服务承诺

重发标准

1. 物流温度记录仪显示高于 - 130℃超12小时

2. 到货72小时内经qPCR检测证实支原体污染

3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)

4. 肌动蛋白表达水平未达技术参数

不予重发情形

1. 客户未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落

2. 自行添加血管收缩剂未按浓度梯度操作

3. 超过建议代数(P8)继续传代导致功能异常

4. 未定期进行α - SMA表达验证即用于实验