一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠肾动脉平滑肌细胞(Rat Renal Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称
RASMC;肾动脉SMC;血管平滑肌细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体经病理学筛查无血管疾病)
组织来源
肾动脉中膜层(经酶消化法分离纯化)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形,平行排列生长,可观察到收缩性伪足
细胞代数
P3 - P8(确保表型稳定及功能性蛋白表达)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS +内皮素 - 1生长添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含8% DMSO及细胞膜稳定剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 60小时(与细胞密度及传代处理相关)
供应限制
仅用于体外研究,禁止临床或体内移植用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴解冻后转移至含5mL培养基的离心管,800rpm离心3分钟
• 培养瓶:表面消毒后静置于培养箱1小时,待温度平衡后更换新鲜培养基
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察生长状态)
传代比例
1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - 0.02% EDTA溶液
• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项
• 避免剧烈吹打(防止收缩蛋白结构损伤)
• 传代后12小时内避免移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO + 20% FBS +渗透压调节剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封
• 程序降温:4℃ 1h → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后12小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
• 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞阳性率需>95%)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 物流温度记录仪显示高于 - 130℃超12小时
2. 到货72小时内经qPCR检测证实支原体污染
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
4. 肌动蛋白表达水平未达技术参数
不予重发情形
1. 客户未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落
2. 自行添加血管收缩剂未按浓度梯度操作
3. 超过建议代数(P8)继续传代导致功能异常
4. 未定期进行α - SMA表达验证即用于实验