一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠大隐静脉内皮细胞（Rat Great Saphenous Vein Endothelial Cells）
- 细胞别称：RGSVEC；大隐静脉内皮细胞；隐静脉内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无血管疾病史）
- 组织来源：大隐静脉血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层排列，接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：内皮细胞专用培养基（含2% FBS+内皮细胞生长因子及肝素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与接种密度及培养条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预温培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置于培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度5×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.05%胰蛋白酶 - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，显微镜下观察细胞边缘收缩后立即终止。
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止细胞间连接蛋白损伤）。
- 传代后24小时更换新鲜培养基以清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透压稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率（≥95%为合格）。
- 功能验证：内皮屏障完整性检测（P5代细胞应维持正常通透性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰余量及包装照片）。
- 收货3日内证实细菌或支原体污染（需提供第三方检测报告）。
- 复苏后细胞存活率低于90%（台盼蓝染色法）。
- 细胞STR鉴定与说明书不符。
- 不予重发情形：
- 客户延迟复苏超过72小时。
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常。
- 反复冻融操作造成细胞损伤。
- 未按规范进行污染检测直接开展实验。
注：以上操作均需在生物安全二级（BSL - 2）实验环境下进行。
