一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠主动脉瓣膜间质细胞(Rat Aortic Valve Interstitial Cells)
- 细胞别称:RAVIC;主动脉瓣膜间质细胞;心脏瓣膜间质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体无心血管疾病史)
- 组织来源:主动脉瓣膜组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或星状,具有典型间质细胞伪足结构
- 细胞代数:P3 - P6(确保表型稳定性及功能活性)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:间质细胞专用培养基(含5% FBS+成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约60 - 72小时(依赖培养基成分及接种密度)
- 供应限制:仅用于科学研究,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时适应环境
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 控制消化时间避免细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(≥85%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P4代细胞应保持收缩特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货7天内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于80%(台盼蓝染色结果)
- 细胞标志物检测与说明书不符
- 不予重发情形:
- 未按规范进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用非推荐消化酶造成细胞损伤
- 超代次使用(P6以上)导致功能异常
- 未定期进行支原体检测引发实验偏差