一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠颈静脉内皮细胞(Rat Jugular Vein Endothelial Cells)
细胞别称:RJVEC;颈静脉内皮细胞;静脉内皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源:颈静脉血管段
生长特性:贴壁生长(需包被胶原基质)
细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多边形
细胞代数:P3 - P6(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+ECGS生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:饱和湿度
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与基质包被浓度正相关)
供应限制:仅用于体外研究,不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
· 冻存管复苏:37℃水浴30秒内解冻,加入3mL预温培养基离心去冻存液
· 培养瓶运输:酒精消毒外壁后静置30分钟再移入培养箱
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
· 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
· 37℃消化45 - 60秒,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
· 消化终止后需立即离心去除酶残留
· 首次换液应在接种后6 - 8小时进行
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)
细胞密度:推荐冻存浓度2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
· 4℃预冷冻存管,分装后程序降温:4℃→ - 20℃(1h)→ - 80℃(12h)→液氮
复苏验证:
· 复苏后12小时检测存活率(需≥90%)
· 功能验证:CD31免疫荧光染色确认内皮特性
四、售后服务承诺
重发条件:
1. 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂
2. 72小时内经第三方检测证实支原体污染
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
免责条款:
1. 客户自行修改培养基配方导致功能异常
2. 未使用原代冻存液进行二次冻存
3. 超时培养(传代周期超过5天)引发的细胞老化