一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠颈动脉成纤维细胞（Rat Carotid Artery Fibroblasts）
- 细胞别称：RCAF；颈动脉成纤维细胞；血管成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：颈动脉组织中分离的成纤维细胞
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶包被的培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，贴壁伸展后呈不规则三角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证细胞功能稳定性和增殖能力）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度及血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置于培养箱2小时，待温度平衡后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）。
- 功能验证：细胞迁移实验（P5代细胞应保持正常迁移活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控记录）。
- 收货后3天内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）。
- 物种鉴定与描述不符（需提供PCR检测结果）。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行细胞复苏（如超时或温度不当）。
- 使用非指定培养基或添加剂导致细胞状态异常。
- 自行修改冻存液配方引起的细胞损伤。
- 未定期进行支原体检测导致实验结果偏差。
