一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠心脏微血管内皮细胞（Rat Cardiac Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：RCMEC；心脏微血管内皮细胞；心肌内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 供体状态：健康成年大鼠（无心血管疾病史，经病原体检测合格）
- 组织来源：心脏组织微血管段（经胶原酶消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，融合后呈梭形或多角形
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数，确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：大鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS及内皮生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-196℃）
- 倍增时间：约48 - 72小时（受培养密度及基质影响）
- 应用限制：仅供科研使用，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.05%胶原酶）
- 37℃消化2 - 3分钟，细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞表面黏附分子）
- 传代后6小时内更换培养基以去除残余酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及胎牛血清替代物）
- 冻存密度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL（确保复苏后高存活率）
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能检测：CD31免疫荧光鉴定（P5代细胞表达阳性）
四、售后服务承诺
- 重发条件：
- 运输过程中温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测结果）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供染色图片）
- 种属鉴定与描述不符
- 不重发情形：
- 收货后超72小时未及时处理
- 使用非推荐培养基或未包被培养器皿
- 操作不当导致反复冻融
- 未按要求进行细胞鉴定直接使用
（注：以上内容基于标准操作流程，具体实验条件需根据研究需求优化。）
