一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠主动脉弓平滑肌细胞
- 细胞别称：Aortic Smooth Muscle Cells；SMC；主动脉弓肌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体经病理学筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：主动脉弓段中膜层（经酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，呈“峰谷”样平行排列
- 细胞代数：P3 - P6（确保收缩功能及标志物表达稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Smooth Muscle Cell Medium（含10% FBS + 平滑肌细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖细胞密度及培养基成分）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免机械吹打过猛（保护细胞骨架完整性）
- 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证：α - SMA免疫荧光鉴定（P4代细胞应保持＞95%阳性率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5日内确认支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞标志物表达缺失（需提供α - SMA/Calponin检测结果）
- 种属鉴定与大鼠基因组不匹配
- 不予重发情形：
- 超时复苏（收货后超过48小时未处理）
- 使用非推荐包被基质导致细胞贴壁失败
- 未按规范进行传代（如消化时间过长或密度过低）
- 实验操作污染未及时反馈
