一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠心肌干细胞(Rat Myocardial Stem Cells)
- 细胞别称:RMSC;心脏干细胞;心肌祖细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别可选,供体经心脏病理学筛查)
- 组织来源:左心室心肌组织(经胶原酶消化法分离)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:梭形或多角形,具备自发节律性搏动特性
- 细胞代数:P3 - P8(维持心肌特异性标志物表达稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:心肌干细胞专用培养基(含5% FBS+心肌分化抑制因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(与心肌特异性代谢活性相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀;培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(搏动频率稳定时优先操作)
- 传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂),37℃消化3 - 5分钟,终止后轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:避免机械吹打过度(防止收缩蛋白损伤);传代后12小时内禁止换液(保障细胞贴壁重组)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及心肌细胞保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心后重悬细胞于冻存液,分装至标记冻存管;程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 4小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证:复苏后48小时检测存活率(台盼蓝法≥85%);功能验证:α - actinin免疫荧光染色(P5代阳性率>90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 干冰运输失效导致细胞失活(需提供温度记录证明);2. 7日内确认微生物污染(需提交第三方检测报告);3. 细胞复苏存活率低于承诺标准;4. 心肌特异性标志物检测不达标
- 不予重发情形:1. 超72小时未进行细胞复苏操作;2. 自行更换培养基导致分化异常;3. 未按规程进行传代致细胞衰老;4. 实验操作污染未及时反馈