一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠股动脉平滑肌细胞（Rat Femoral Artery Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：FASMC；股动脉SMC；血管平滑肌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：股动脉中膜层（经酶消化法分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤形，可呈“峰谷状”多层生长
- 细胞代数：P3 - P8（维持收缩功能与标志物表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：平滑肌细胞专用培养基（含10% FBS +平滑肌细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度及培养基批次影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免机械刮取损伤细胞膜（推荐酶消化法）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞阳性率应＞95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）
- 7天内证实支原体或真菌污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微照片）
- 标志物表达与描述不符（需提供流式检测数据）
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行胶原包被导致细胞贴壁失败
- 使用高浓度血清（＞15%）引起异常增殖
- 自行修改消化流程造成细胞膜损伤
- 未定期检测细胞收缩功能导致实验偏差
