一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠股动脉内皮细胞(Rat Femoral Artery Endothelial Cells)
- 细胞别称:RFAEC;股动脉内皮细胞;动脉内皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:股动脉血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖明胶或纤维连接蛋白包被的培养器皿)
- 细胞形态:单层铺展呈多角形,接触抑制后形成典型“铺路石”样排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与遗传背景一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+内皮细胞生长因子及肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(与细胞密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱1小时恢复代谢
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化1 - 1.5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项:
- 消化时间严格控制,避免损伤细胞间连接结构
- 首次换液需在传代后12 - 18小时进行,移除残余消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:CD31免疫荧光染色及体外血管形成实验(P5代细胞应保持活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
- 到货3日内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 复苏后活力低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 细胞种属鉴定结果不符
- 不予重发情形:
- 收货后超72小时未按规范复苏
- 自行更换培养基或添加未经验证的生长因子
- 未按梯度降温导致冻存细胞损伤
- 实验前未进行支原体检测引发交叉污染
注:所有操作需符合生物安全规范,细胞数据来源于实验室标准流程,实际表现可能因实验条件略有差异。