一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠腹腔主动脉外膜成纤维细胞
细胞别称
AAoAF细胞；主动脉外膜成纤维细胞；血管外膜成纤维细胞
种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别
健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
组织来源
腹腔主动脉外膜层（经胶原酶消化分离）
生长特性
贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被培养器皿）
细胞形态
典型长梭形或不规则三角形，贴壁伸展后呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8（保证细胞活性与功能性稳定）
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
约36 - 48小时（依赖培养密度与生长因子浓度）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基离心洗涤后接种
培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置于培养箱平衡1小时后换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项
避免机械刮取（易导致细胞膜损伤）
传代后12小时内避免频繁观察以减少扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期储存
复苏验证
复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应保持基质合成活性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供温度记录数据）
2. 5天内证实支原体污染（需提供荧光PCR检测报告）
3. 细胞贴壁率低于80%（复苏后24小时评估）
4. 种属鉴定结果与大鼠不符
不予重发情形
1. 客户未按推荐密度进行传代导致细胞老化
2. 使用含抗生素培养基掩盖潜在污染
3. 解冻后离心转速超过300g造成机械损伤
4. 未进行原代细胞特性验证直接用于实验
